PCR විශ්ලේෂණය යනු කුමක්ද?
පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියා (PCR) විශ්ලේෂණය යනු ආම්පන්නය ලෙස හැඳින්වෙන ක්රියාවලියක් මගින් නියැදියක කුඩා DNA ප්රමාණයක් කුඩා ප්රමාණ හඳුනා ගැනීම සඳහා විද්යාගාර තාක්ෂණයකි. PCR ආම්පන්නය තුලදී, විශ්ලේෂණය හා හඳුනා ගැනීම සඳහා ප්රමාණවත් තරම් ප්රමාණවත් වන තෙක් උනන්දුවක් දක්වන DNA අණුව නැවත නැවතත් පිටපත් කර ඇත. නිදසුනක් ලෙස PCR භාවිතා කළ හැකි වන්නේ මුත්රා සාම්පලයක ඇති ගොනෝරියා හෝ ක්ලැමීඩියා ඇතිවන ජීවීන්ගෙන් කුඩා DNA ප්රමාණයක් හඳුනාගැනීම සඳහාය.
PCR වැඩ කරන්නේ කෙසේද?
PCR වල පළමු පියවර වන්නේ නියැදි උණුසුම් කිරීම සඳහා ද්විත්ව දිරන ලද DNA මගින් එක් තනි කෙඳි දෙකක් වෙන් කිරීමයි. මෙය denaturacija ලෙස හැඳින්වේ. ඉන්පසු DNA අණුවක DNA අණුවල කෙටි මාදිලි වලට සමානුපාතව පැමිනුම් , DNA නියැදි සමග ඒකාබද්ධ වේ. මෙය පසුව, DNA පොලිමරේස් භාවිතා කරන ලද DNA ස්ථානය නැවත ආරම්භ කිරීම සඳහා යොදා ගනී. අන්තිමේදී, DNA නැවත නැවත වරක් වෙන් කිරීමට රත් වන අතර, මුළු PCR ක්රියාවලිය නැවත ආරම්භ වේ.
එක් PCR චක්රයෙන් නිරූපණය වන නියැදියේ අඩංගු වන DNA කාණ්ඩයේ ප්රමානය වැඩි වේ: එක් පිටපතක් දෙකක් බවට පත්වෙයි, ඉන්පසුව එය හතර, පසුව අටක් බවට පත් වේ; පොදුවේ ගත් කල, ඩීඑන්ඒ ප්රශ්නයට (සහ, විශ්ලේෂණය සඳහා ප්රමාණවත් සාම්පලයක් ලබා දීමට) තීරණය කිරීමට සයිකල් 20 ත් 40 ත් අතර ප්රමාණයක් අවශ්ය වේ.
පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාවල සෑම පියවරක්ම - ඩීඑන්ඒ, මැග්නීසියම් , ඩීඑන්ඒ ආර්තවඩය යෙදීම , විවිධ උෂ්ණත්වවලදී සිදු වේ. එබැවින්, ආරම්භක මිශ්රණය එකට එකට එකතු කිරීමෙන් පසු, එක් එක් පියවර සඳහා අවශ්ය තරම් මට්ටම්වල උෂ්ණත්වය පවත්වා ගෙන යනු ඇත.
මේ අනුව, PCR යනු මානව මැදිහත්වීමක අවශ්යතාවයක් නොමැති තනි පරීක්ෂක නාලයක් තුළ ඉලක්කගත DNA ප්රමාණයේ සංකලනය කිරීම සඳහා කාර්යක්ෂම ක්රමයකි.
පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව යනු 1980 ගණන්වල මුල් අවධියෙහි ප්රථම වරට දියුණු කරන ලද ජෛව තාක්ෂණික ශිල්පයේ විප්ලවයක් වූ අතර PCR නිර්මාතෘ කරි මුල්ලිස් විසින් 1993 වසරේදී රසායන විද්යාවේ නොබෙල් ත්යාගය දිනා ගත්තේය.
ලිංගාශ්රිතව පරීක්ෂා කිරීම සඳහා PCR අදාල වන්නේ ඇයි?
පොලිමරේස් දාම ප්රතික්රියාව, ලිගයිස් දාම ප්රතික්රියාව වැනි ආශ්රිත තාක්ෂණික ක්රමවේදයන් මගින් ලිංගාශ්රිතව පරීක්ෂා කිරීම සඳහා වන වැදගත්කම පෙන්නුම් කරයි. මෙම ක්රම මගින් සෛල DNA හෝ RNA සාම්පල කුඩා ප්රමාණයක් නිපදවිය හැක. ව්යාධිජනක ජානමය කේතය රෝගය ජීවියාට අවශ්ය නොවේ. බැක්ටීරියා සංස්කෘතිය හෝ වෛරස් සංස්කෘතිය වැනි ය . එය හඳුනාගත හැකි ප්රතිදේහ ප්රතික්රියාවක් වර්ධනය කර ගැනීම සඳහා බොහෝ කලකට පෙර ආසාදනය සිදුවිය යුතු නැත ( ELISA මගින් අනාවරණය කරගත්). මෙය PCR ශිල්පීය ක්රම සමහර විට අනෙකුත් පරීක්ෂණවලට වඩා රෝග හඳුනා ගත හැකිය. සාම්පල ජීවත්වීම ගැන හෝ නිවැරදිව නිවැරදිව පරික්ෂා කිරීම ගැන සැලකිලිමත් විය යුතුය.